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目的基因反向连接
目的基因
的
反向连接
是什么意思?
答:
目的基因反向链接
的意思是基因序列颠倒反向了。第一,打个比方,目的基因原本正确顺序为ATGCGT,目的基因反向链接TGCGTA了,完全反向颠倒链接了。第二,反向链接,造成序列完全改变,后果是基因无法表达,翻译不出来来蛋白质,或者不是原来想要的蛋白质等后果。第三,通常采用双酶切手段来产生不同的黏性末端...
如何是
目的基因
的自我环化和
反向连接
答:
双酶切.在
基因
两端分别用不同的内切酶来酶切,载体上也用这两种酶来酶切.这样自己的酶切位点只能识别自己的位点,就不会发生基因方向的错误了.而且载体的两个位点互相不识别,也不会自
连接
.
慢病毒质粒正向和
反向
答:
1、慢病毒正向连接即
目的基因
顺时针地按其上游到下游的方向与载体相连(与启动子的顺时针方向一致),这样,目的基因就能从上游到下游正常转录,表达产生所需的蛋白质,产生预期的性状。2、慢病毒
反向连接
指目的基因的上下游方向颠倒地与载体相连,结果目的基因的转录从下游到上游,导致密码子全部改变,目的...
高中生物
基因
工程,正反两种结构是指怎样
连接
?
答:
因为同种限制酶切割,产生的黏性末端相同,即
目的基因
两端暴露出来的碱基序列相同,与质粒相连时,若目的基因的正确碱基序列由左到右,则与质粒
连接
为正确连接。由于目的基因两州黏性末端相同,可以造成右侧连上(说简单点,就是启动子位置改变)这就是
反向
相连.
为什么
目的基因反向连接
不能正常表达?不是回文序列吗?
答:
因为并不是说
目的基因
就是回文序列。只是说目的基因两端具有可以作为DNA限制性核酸内切酶识别位点的回文序列,而不是说整个目的基因都是回文序列。目的基因本身的序列是具有方向性的。
为什么PCR鉴定
目的基因反向连接
时连到一条链上
答:
扩增一段已知序列旁侧的DNA。
反向
PCR的
目的
在于扩增一段已知序列旁侧的DNA,也就是说这一反应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成DNA。
目的基因
和质粒如果有相同的黏性末端会发生
反向连接
吗?
答:
会。黏性末端所具有的互补性可以使得两个不同的DNA分子相互结合。如果两端的互补序列相同,则它们可能会发生非特异性的互相
连接
。这种非特异性的连接可能会使得
目的基因
与质粒之间的DNA序列顺序出现错误,从而影响其在宿主细胞中的表达和功能。
为什么同种限制酶切割形成的末端相同时
目的基因
与质粒会
反向连接
...
答:
限制酶的识别位点大多是反向对称的,如果只用用同种酶切,所得片段的2端序列相同,在连接时,是随机连接,不仅会出现
反向连接
,而且会出现片段串联。在分子克隆实验中,我们会用两种酶分别切
目的基因
和质粒的上下游,这样就保证了目的片段和质粒片段在连接时的方向性,如上游都用EcoR I,下游都用BamH。...
什么叫做
目的基因
与质粒
反向连接
(2012江苏生物卷基因工程题最后一空...
答:
同种酶酶切 两端的粘端相同 这样子
目的基因
有可能正向插入载体 也可能
反向
插入 (目的片段两个方向都能与载体
连接
)但是只有一个方向是正确的
第二题中,什么是
目的基因
与载体之间的
反向连接
,为什么避免这个可以...
答:
目的基因
具有从起始密码子到终止密码子的方向性,必须正向
连接
才能获得正确克隆,构建的载体才能正确表达目的蛋白。
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