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退火温度和什么有关
PCR反应
退火温度
的高低
与什么
因素
有关
答:
退火温度在PCR反应中扮演着关键角色,它直接影响着反应的特异性。
主要受到引物的长度、碱基组成和浓度的影响
。引物越短,G+C含量越低,所需的退火温度就越低,但过低可能导致非特异性扩增增加。提高退火温度虽然提高特异性,但可能降低扩增效率。退火温度通常通过Tm公式估算,然后减去5℃以优化反应设计。PCR...
PCR反应
退火温度
的高低
与什么
因素
有关
答:
首先,
引物的长度和碱基组成影响退火温度
。一般来说,较短的引物和G+C含量较低的引物,其退火温度可以设定得较低。然而,这可能导致错配增加,非特异性扩增的风险增大。为了平衡特异性与扩增效率,通常推荐在Tm值(引物的理论退火温度,计算公式为Tm=4(G+C)+2(A+T))基础上减去5℃左右作为实际退火...
PCR反应
退火温度
的高低
与什么
因素
有关
答:
退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素
。引物与模板复性所需要的退火温度取决于
引物的长度、碱基组成及其浓度
。引物长度越短,引物中G+C的含量越低,所需的退火温度越低。虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升。相反,提高退火温度虽然可以提高反应的...
PCR反应
退火温度
的高低
与什么
因素
有关
答:
退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素
。引物与模板复性所需要的退火温度取决于
引物的长度、碱基组成及其浓度
。引物长度越短,引物中G+C的含量越低,所需的退火温度越低。虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升。相反,提高退火温度虽然可以提高反应的特异性,但会引起...
不锈钢硬度和
退火温度有什么关系
答:
不锈钢屈服强度与抗拉强度都随退火温度的升高而提升
,但是当退火温度高于740℃以后,屈强比持续上升,说明屈服强度要比抗拉强度增加幅度大,伸长率随之下降,这主要是由于马氏体含量增加所致。试验钢在720℃退火时,残留奥氏体含量为6.1%,随着退火温度的升高,残留奥氏体量保持在4.5%左右。当试验钢的退火...
退火温度与
引物的TM值有
什么
联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适...
答:
退火温度与
引物的TM值的关系主要和DNA聚合酶与其buffer
有关
。有些退火温度要比TM低5度、3度,有些还会高3度,有些是一模一样的。主要参考不同公司所生产的DNA聚合酶的说明书。
做pcr,如何确定最佳
退火
及延伸的时间和
温度
?
答:
延伸一般都是72° 时间是根据酶的种类和片段长度决定的
退火温度
根据引物来决定 一般先用55° 不行的话再往下降
PCR中rox加多了有
什么
影响
答:
影响不大 如果严格点;引物的
退火温度
实际上是和浓度
有关
的,所以多加了相当于降低了退火温度,会产生非特异性扩增产物影响不大 如果严格点,引物的退火温度实际上是和浓度有关的,所以多加了相当于降低了退火温度,会产生非特异性扩增产物
玻璃
退火
的
温度
答:
玻璃的
退火温度
与其化学组成
有关
。凡能降低玻璃粘度的组成也能降低退火温度,如碱金属氧化物 Na 2 0 、 K 2 O 等。 SiO 2 、 Al 2 O 3 、 CaO 等都增加玻璃粘度,所以随着它们含量的增加其退火温度都提高。玻璃的退火制度与制品的种类、形状、大小、容许的应力值、退火炉内温度分布等情况有关...
退火温度
低会对PCR产生
什么
影响?
答:
通常来说,
退火温度
是由引物的GC%含量决定的,但是反应体系的条件改变也会影响引物的退火温度(如Mg,Na等离子浓度)。建议你去http://www.idtdna.com/analyzer/Applications/OligoAnalyzer/分析一下你的PCR体系中的引物退火温度,而不是仅仅由公式计算得出。一般情况下,退火温度过低只会导致反应体系中引物与DNA模板的非特...
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