做好westernblot需要注意各种细节,转给需要的你!答:3.在电转的同时,可以配制以下液体,事先根据膜的数量计算好所需体积: 以一块膜为例,封闭5ml+稀释一抗4ml+稀释二抗4ml,需要13ml,则配制15ml。 5% BSA溶液(w/v):配制15ml 5% BSA溶液(w/v),称取0.75g BSA晶体,溶于15mlTBST中,漩涡振荡器混匀,现用现配,4℃保存(若目的蛋白为磷酸化蛋白时配制)。 5%牛奶...
SDS裂解DNA时,加入TE的浓度是多少?有影响么?答:1、将1mlEDTA抗凝贮冻血液于室温解冻后移入5ml离心管中,加入1ml磷酸缓冲盐溶液(PBS),混匀,3500rpm离心15min,倾去含裂解红细胞的上清。重复一次。用0.7mlDNA提取液混悬白细胞沉淀,37℃水浴温育1h。2、将上述DNA提取液混悬白细胞,37℃水浴温育1h后,加入1mg/ml蛋白酶K0.2ml,至终浓度为100-200ug/ml,上下转动...