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pcr反应有何特点
什么是
PCR
,有什么
特点
,扩增
反应有
哪几个步骤?
答:
PCR即聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR),
具有特异、敏感、快速等特点
。扩增反应包括3个步骤,变性、退火(复性)、延伸3个步骤。
pcr
原理是什么?
答:
pcr反应特点:1.特异性强
。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及TaqDNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,...
PCR反应特点
答:
PCR反应以其独特的特点在生物学研究中占据重要地位。首先,
PCR的特异性得益于几个关键因素:引物与模板DNA的精确结合,遵循严格的碱基配对规则
;Taq DNA聚合酶的高度忠实性,使其能在高温环境中稳定进行,确保结合的特异性增强,扩增出的基因片段准确性极高。选择具有高特异性和保守性的靶基因区域,进一步...
介绍一下
PCR
答:
此酶具有以下特点:①耐高温
,在70℃下反应2h后其残留活性大于原来的90%,在93℃下反应2h后其残留活性是原来的 60%,在95℃下反应2h后其残留活性是原来的40%。②在热变性时不会被钝化,不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效 率,增加了扩增长度(2.0Kb)。由于提高了扩增的特异性和...
PCR
进行的基本条件是什么??
答:
PCR反应
进行的条件:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增...
PCR
扩增的
反应特点
答:
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:①引物与模板DNA特异正确的结合;②碱基配对原则;③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;④靶基因的特异性与保守性。其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中...
pcr
都需要什么原料
答:
pcr
需要的原料有:物(
PCR
引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适
反应
温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(...
PCR
扩增的
反应
条件
答:
PCR
扩增的
反应
条件:10×扩增缓冲液 10ul;4种dNTP混合物 各200umol/L;引物 各10~100pmol;模板DNA 0.1~2ug;Taq DNA聚合酶 2.5u;Mg2+ 1.5mmol/L;加双或三蒸水至 100ul。PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,...
哪种抗凝剂对
pcr反应具有
抑制作用
答:
肝素。它存在于肺、血管壁、肠粘膜等组织中,是动物体内一种天然抗凝血物质。天然存在于肥大细胞,现在主要从牛肺或猪小肠黏膜提取。作为一种抗凝剂,是由二种多糖交替连接而成的多聚体,在体内外都有抗凝血作用。肝素首先从肝脏发现而得名,由葡萄糖胺,L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛...
PCR
技术的原理是什么
答:
Pcr技术具有特异性强、灵敏度高、简便快速、纯度要求低等特点
。PCR产物的生成量是以指数方式增加的,PCR的灵敏度可达3个RFU;在细菌学中最小检出率为3个细菌。PCR反应用耐高温的聚合酶,一般在2-4小时就可以完成扩增反应。而且不需要分离病毒或者是细菌及培养细胞等过程,DNA的粗制品以及RNA均可以作为...
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