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pcr扩增的引物是什么
关于
pcr扩增
答:
DNA有终止子的,
扩增
到终止子的地方就停止了。具体终止子怎么把它终止的,看生化课本吧。不同物种的DNA也不一样。一般给你碱基序列的那条模板,假设为A链,它的互补链是B链。第一次延伸:上游
引物是
识别B链往下延伸的,它延伸出来的碱基序列跟A链一样。下游引物是识别A链往下延伸,它延伸出来的序列...
PCR扩增的
扩增物
答:
端被固定了止点,保证了新片段的起点和止点都限定于
引物扩增
序列以内、形成长短一致的 “短产物片段”。不难看出“短产物片段”是按指数倍数增加,而“长产物片段”则以算术倍数增加,几乎可以忽略不计,这使得
PCR的
反应产物不需要再纯化,就能保证足够纯DNA片段供分析与检测用。
PCR引物
的长短对
扩增
效果有
什么
影响?
答:
ACCCC或ATATATAT;引物内部或者两条引物之间避免有5个碱基以上的互补序列;两条引物的 3’端避免有3个碱基以上的互补序列。6. 序列特异性:引物设计完毕请使用 NCBI BLAST功能检索引物特异性,以避免非特异性
扩增
产生。注意:
PCR的
产量通常取决于
PCR引物
的3’端,引物间形成二聚体会降低扩增效率。
高中生物
pcr
技术
扩增的是
两
引物
之间的核苷酸序列
是什么
意思
答:
PCR是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待
扩增的
DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经"高温变性--低温退火--
引物PCR扩增
仪延伸"三步反应的多次循环,使DNA片段在数量上呈指数增加,从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。在环境检测...
大肠杆菌质粒DNA
扩增
时
引物
序列
是什么
?是碱基序列。它的质粒DNA都一样...
答:
E.coli有很多种质粒。不同菌株具有不同的质粒。不同质粒的DNA序列不同。如果你说(完整)质粒扩增,只需要培养细菌就可以,质粒本身就可以自行复制(扩增),达到扩增目的。需要
引物
(碱基序列)进行
PCR
体外
扩增的
的指的是一小段DNA序列(而不是完整的质粒或染色体)的扩增或克隆。希望你能明白。
PCR
技术
扩增
目的基因中
的引物
有
什么
作用?
答:
1.与DNA复制中的作用类似,但是在细胞内有其他的酶进行这项工作。
在PCR
技术中,只加入了四种底物和Taq酶,模板。DNA聚合酶只能在有3‘端时才能复制下去。2.决定
扩增
片段。扩增目的基因,就要根据目的基因两侧序列设计
引物
,这样只有目的基因扩增了,得到大量目的基因。这是PCR技术的一项重要应用。
PCR
技术
扩增
目的基因中
的引物
有
什么
作用?
答:
引物
的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导DNA的合成。能设定循环次数,及控制复制次数。
PCR
循环次数主要取决于模板DNA的浓度。一般的循环次数选在30~40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之增多。
利用
PCR
技术
扩增
目的基因时,
引物
Ⅰ和引物Ⅱ是相同的吗?
答:
不相同,而且是从根本上就不同,即序列不同。
PCR扩增是
一段目的基因,”目的“的意思就是指定的序列,指定的方法就是前后各用一条
引物
定位。所以两条引物一般称为”上游引物“和”下游引物“。两引物分别对应不同的序列,中间就是需要
扩增的
部分。
PCR
时为
什么
要加一对
引物
,只加一对中的一条会有什么问题?
答:
当只加入1条引物,
PCR的扩增
产物量不会多,因为当DNA双链解开,只有一条引物结合到模板链进行延伸,但是另一条链没有相应
的引物
扩增,体系中的双链不会新增。在进行逆转录实验时,只加入一条引物,利用反转录以一条DNA单链为模板,也即以一条引物为转录的起始。
PCR
技术的原理
是什么
?
答:
PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸
引物
。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经
PCR扩增
形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板...
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