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transwell铺基质胶
灵魂粘合剂快速刷法
答:
使用前2h在冰水混合物中解冻,用冰水浴一直保持温度在4度左右。把细胞打进胶里混匀,1:1混合。细胞数量延用文献报道,可预实验摸索。此BD的matrigel使用说明供参考。典型方法是首先要制备出含有肿瘤干细胞的组织悬液,然后将它们培养在一个支持介质(如
基质胶
Matrigel)上, 使其能够三维生长。
transwell
...
结晶紫染色后的细胞能保存多久
答:
24小时左右。实验前将保存在-20℃的
基质胶
转移至4℃冰箱融化过夜,使用前用无血清培养基按培养基:基质胶=2:1的比例稀释;接种前将24孔板和
Transwell
小室用1×PBS浸泡5min湿润小室。用胰蛋白酶消化细胞后,用无血清培养能保存24小时左右。结晶紫染色是具有超长的使用时间的,是可以过夜的,不会影响到...
Transwell
试验方法
答:
使用液为1×PBS(用无菌水进行1:9稀释)。3)冰乙酸:甲醛(1:3)4)
Transwell
小室(BD,Bioscience)5)Matrigel
基质胶
(BD,Bioscience,50ug/ml):商品化,保存-20°。6)各种规格的枪头、1.5ml离心管及10ml玻璃离心管:高温灭菌后备用,其中准备一些枪头与1.5ml的离心管于-20ºC预冷,备用。7...
transwell
实验染色后可以放多久
答:
最好是24小时。实验前将保存在-20℃的
基质胶
转移至4℃冰箱融化过夜,使用前用无血清培养基按培养基:基质胶=2:1的比例稀释;接种前将24孔板和
Transwell
小室用1×PBS浸泡5min湿润小室。用胰蛋白酶消化细胞后,用无血清培养液洗涤细胞,用含有1%FBS的培养基重悬细胞计数。培养24h后(侵袭实验培养48h后...
求助做
transwell
时结晶紫染色的具体详细步骤
答:
① 用棉签擦去
基质胶
和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%结晶紫染色。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接...
内皮细胞成管为什么要使用
基质胶
答:
Matrigel可自动聚集产生类似于哺乳动物细胞基底膜的生物活性基质材料.
基质胶
用于制备各种要求的基底膜基质,用于细胞信号研究,诸如:鼠肾干细胞形成肾小管过程中生长因子作用研究,鼠乳腺上皮干细胞的基因表达研究,
transwell
的肿瘤侵袭力实验等. Matrigel可以有效帮助上皮细胞等各类细胞的附着和分化,这些细胞类型...
用聚碳酸酯膜的
transwell
板怎么知道细胞长好没有
答:
两者都是分上室下室,上下室中间有聚碳酸酯膜,细胞种在上室,下室有营养成分,唯一不同的是细胞侵袭实验中,聚碳酸酯膜上室侧铺一层
基质胶
,用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶将基质胶降解,才可以通过聚碳酸酯膜。至于具体怎么做,需要注意什么,可以问一下中洪博元...
12孔板做
transwell
加多少培养基
答:
一般12孔细胞培养板每一个孔加入1ml培养基。
transwell
实验原理简单地说就是用一层膜将高营养的培养液和低营养的培养液隔开,细胞放在低营养的培养液里,为了找吃的,细胞会往高营养的培养液里面跑,但是有膜挡着,所以要穿过膜才行。我们在膜上涂上一层
基质胶
,模仿细胞外基质,于是细胞要把基质消化...
什么是
基质胶
答:
基质胶
是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下,Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,可...
matrigel
基质胶
怎么溶解
答:
4度过夜,化开混匀,全程冰上操作
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