区别如下：
1、文件格式不同。xls 是一个特有的二进制格式，其核心结构是复合文档类型的结构，而 xlsx 的核心结构是 XML 类型的结构，采用的是基于 XML 的压缩方式，使其占用的空间更小。xlsx 中最后一个 x 的意义就在于此。
2、版本不同。xls是excel2003及以前版本生成的文件格式，而xlsx是excel2007及以后版本生成的文件格式。
3、兼容性不同。xlsx格式是向下兼容的，可兼容xls格式。
扩展资料：
XLS 就是 Microsoft Excel 工作表，是一种非常常用的电子表格格式。xls文件可以使用Microsoft Excel打开，另外微软为那些没有安装Excel的用户开发了专门的查看器Excel Viewer。
使用Microsoft Excel可以将XLS格式的表格转换为多种格式：XML表格、XML数据、网页、使用制表符分割的文本文件（*.txt）、使用逗号分隔的文本文件(*.csv)等。
xlsx是Microsoft Office EXCEL 2007/2010/2013/2016/2019文档的扩展名。xlsx是从Office2007开始使用的，是用新的基于XML的压缩文件格式取代了其目前专有的默认文件格式，在传统的文件名扩展名后面添加了字母x（即：docx取代doc、.xlsx取代xls等等），使其占用空间更小。
参考资料：百度百科-xls
参考资料：百度百科-xlsx
现代的学习和工作当中，
Office系列办公软件通常都是不可或缺的，
而xls和xlsx都是Microsoft Excel电子表格应用程序中的文件格式，
xls和xlsx区别
二者的区别主要在于以下几点：
格式不同
XLS是Excel的早期版本使用的文件格式，
而XLSX则是Excel 2007及以后版本中主要使用的新文件格式。
xlsx是Microsoft Office EXCEL 2007/2010/2013/2016/2019文档的扩展名。
文件大小
存储容量：xls 格式的文件最大支持 65,536 行、256 列，
而 xlsx 格式的文件最大支持 1048576 行、16384 列。
因此，xlsx 格式可以存储更多的数据。即在保存相同内容的情况下，xlsx 格式的文件通常比 xls 格式的文件更小。
文件大小的区别
功能和兼容性
功能差异：xlsx 格式支持更多的函数和公式，例如 SUMIFS、AVERAGEIFS 等。
同时，xlsx 格式还支持更多的条件格式、数据验证、图表类型等高级功能。
xlsx 格式是向上兼容的，即 Excel 2007 及以上版本可以打开 xlsx 和 xls 格式的文件。
而xlsx的优点主要体现在，
提供了更高的存储效率、更好的数据共享和交流便捷性以及更好的数据安全性。
尽管旧版本Excel用户可能需要适应新格式，
但XLSX的普及为电子表格应用程序的使用带来了更多的便利和效益。