第1个回答 2022-11-03
什么是革兰氏染色法？染色过程应注意什么
革兰氏染色最常用的细菌鉴别染色法之一。未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。革兰氏染色属复染法，即将标本固定后，先用龙胆紫染色，加碘液媒染后用酒精脱色，再用稀释复红复染。染色后除可以看到细菌形态外，还可将细菌分为两大类，即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G+）。被酒精脱色复染成红色者为革兰氏阴性菌（G-）。革兰氏染色原理尚不肯定，可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、碳疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性。所以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定，以对疾病做出诊断。又由于各种抗生素的抗菌谱不同，革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。
微生物进行革兰氏染色时应注意哪些事项?
1.选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。 2.涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性。 3.脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性。
微生物染色的革兰氏染色要点
1、 待检菌菌龄应为18-24小时。一般情况下，革兰氏阴性菌的染色反应较为稳定，不易受菌龄的长短影响；而革兰氏阳性菌，有的在幼龄时呈阳性，超过24小时可变为阴性。故培养物越陈旧，菌细胞衰老、死亡，则染色常为阴性，造成错判。2、 涂片以匀薄为佳，切不可浓厚。过于密集的菌体，因洗脱不匀常呈假阳性。镜检革兰氏染色反应时，要以分散开的细菌着色为准。涂片后不宜用火焰烤乾，宜自然干燥；若经火焰固定时，应以不烫手为度，以免菌体受损，致使染色反应不准。3、 革兰染色操作的关键步骤是对脱色的掌握，脱色时间不足，革兰氏阴性菌可染成阳性菌；脱色过度，革兰阳性菌会染成阴性菌。故应注意掌握，以无紫色脱出时立即水洗。脱色时间按涂沫厚薄、涂片含水量多少适当掌握，涂沫厚、涂片含水少（水洗后沥干水分）时，脱色时间稍长；涂沫薄、涂片含水量多（未沥干）时，脱色时间稍短，在20-30秒内调整。4、 碘液配制后，应装在密闭的暗色瓶内储存。如因储存不当，部分碘将被挥发或被还原，试液由原来的红棕色变为淡黄色，以至影响固定甲紫的作用，故不宜再用。5、 革兰氏染色能否获得满意的结果，与操作者的经验有很大关系。操作没有把握或对染液有怀疑时，应以对照菌同时染色。
革兰氏染色在进行细菌涂片时应注意哪些环节
涂片时取菌量要适宜且要涂抹均匀，避免造成菌体堆积而难以看清细胞个体形态，同时，也应该避免菌体太少而难以在显微镜视野中找到细胞