HPLC检测金银花中的绿原酸时，溶解样品的溶剂为什么用50%的甲醇溶液，而不用100%的甲醇？加水目的是什么？

Question

此两种操作的结果哪个准，为什么全甲醇溶解的会高些？
顺便问下哪位有相关的国家标准发来看看

Answer 1

Hplc仪器，一般用的流动相都是甲醇，甲醇最为常用。hplc没工作的时候，色谱柱也是泡在甲醇里面的。要测量其他液体需要先怕甲醇排掉。

其次，做hplc不是溶解度越高就越好。色谱的检出限非常低，10-6都可以检验出来，所以很多样品其实都需要稀释，浓度过高会把检测器烧坏，也让色谱柱彻底毁掉。追问

甲醇在液相色谱上优势显而易见，但是乙醇相对来说对于样品溶解的更好，如果说浓度高的话，我可以用甲醇继续稀释成低浓度的就可以了，为什么偏偏加水？作用何在？而且用纯甲醇溶的比稍微加水的检测值至高一点点，比如纯甲醇溶的，检测含量为170Mg/100g；溶剂里稍微加水的，检测含量是165mg/100g。如果这个值恰巧压在合格线上，就麻烦了，所以想弄清楚点，不能光按标准做。感谢您的评论。

追答

因为我们做hplc也不是全部用纯的甲醇啊，柱子是浸在甲醇里的，等下开始做实验也要慢慢降得，然后在加入试样啊。这也是HPLC不如GC那么快捷的原因

追问

检测维生素D3时，流动相用的就是100%甲醇，怎么不可能用100%？

Answer 2

首先得了解一下绿原酸的在水和乙醇中的溶解性，追问

相关资料如下
溶解性：25 ℃水中溶解度为 4%，热水中溶解度更大；易溶于乙醇及丙酮，极微
溶于醋酸乙酯。
没有提到甲醇，也就是说在水中溶解度不如在乙醇中的大，为什么提取时不用100%乙醇，又为什么用100%甲醇。