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特异扩增PCR的用途
PCR的
原理
答:
PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程,其
特异
性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经
PCR扩增
形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引 物...
qpcr技术原理及应用是什么?
答:
首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,
扩增
合成目的片段。RT-
PCR
技术灵敏而且
用途
广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染...
pcr
tp是什么意思?
答:
PCR
TP是指聚合酶链式反应温度程序控制,是PCR技术的重要组成部分。该技术可以在体外复制DNA分子,从而实现对其的定量与检测。PCR TP可通过控制反应体系的温度变化,实现DNA目标序列的
特异
性
扩增
,扩增产物可以通过电泳等手段进行分离与检测。PCR TP在分子生物学、遗传学、医学等领域均有着广泛
的用途
。PCR ...
RT-
PCR的
原理是什么?有何
用途
?
答:
由于逆转录反应使用了引物和模板,也是聚合酶链式
扩增的
(
PCR
是‘链式扩增反应’polymerase chain reaction 的缩写)故称为RT-PCR。再说其
用途
:我们提取的RNA主要是rRNA,即核糖体RNA,但很少有人用它做些什么,倒是含量较少的mRNA,即信使RNA是中心法则所述的遗传信息表现的中转站,所以我们要把微量的...
qpcr原理及应用
答:
首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,
扩增
合成目的片段。RT-
PCR
技术灵敏而且
用途
广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染...
RT-
PCR的
原理是什么?有何
用途
?
答:
由于该酶的效果与中心法则(DNA所承载的生物信息表达顺序应该是DNA-RNA-蛋白)顺序相反,故而有'逆转录'之称。由于逆转录反应使用了引物和模板,也是聚合酶链式
扩增的
(
PCR
是‘链式扩增反应’polymerase chain reaction 的缩写)故称为RT-PCR。再说其
用途
:我们提取的RNA主要是rRNA,即核糖体RNA,但很少...
PCR的
原理,包括它的
特异
性
答:
最基础的原理就是碱基互补配对,其他再详细的在网上很容易查到,我就不说了。关于特异性是因为引物设计的特异性,使引物能和模版上的特定片段配对,在最优条件下
特异扩增
。如果条件变了,也会出现非特异条带的。
pcr的
引物有什么作用?
答:
pcr
中引物的作用:找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地
扩增
模板DNA序列。引物是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与目的基因一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与目的基因另一端的另一条DNA模板链互补。在
PCR
(聚合酶链式反应)技术中,已知一段目的基因的核苷酸序列,根据这一序列合成引物,...
为什么说
PCR扩增
产物具有
特异
性?
答:
Mg2+浓度 Mg2+对
PCR扩增
的特异性和产量有显著的影响,在一般的PCR反应中,各种dNTP浓度为200umol/L时,Mg2+浓度为1.5~2.0mmol/L为宜。Mg2+浓度过高,反应特异性降低,出现非
特异扩增
,浓度过低会降低Taq DNA聚合酶的活性,使反应产物减少。 PCR反应条件的选择 PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置:...
PCR扩增
的反应特点
答:
扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活组织等粗制的DNA扩增检测。
PCR扩增
产物分析PCR产物是否为
特异
性扩增 ,其结果是否...
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