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pcr技术扩增目的基因的过程
请简述
PCR技术扩增目的基因的
基本
过程
??
答:
1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA 2.退火(25℃-65℃):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右最佳的活性)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5′端→3′ 端延伸,合成与模板互补的DNA链。每一循...
利用
PCR技术扩增目的基因的过程
中,需加入( )A.耐高温的解旋酶以保证DNA...
答:
A、PCR技术中,采用高温使DNA解旋,并没有使用解旋酶,故A错误;B、利用
PCR技术扩增
DNA
的过程
中,需要2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸,故B正确;C、PCR技术的原理是DNA复制,需要4中足量的脱氧核糖核苷酸作为原料,故C错误;D、利用PCR技术扩增DNA的过程中,需要一定量的缓冲溶液以维持pH...
pcr扩增
的原理和步骤
答:
典型的PCR包括高温变性、低温退火、中温延伸三个步骤
,通过将这一套过程不断循环,使DNA得以成百万倍的扩增。
简述转
基因
微生物制药的基本流程
答:
第一步:
目的基因的
获取 1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。2.原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。3.
PCR技术扩增目的基因
(1)原理:DNA双链复制 (2)
过程
:第(一)步:加热至90~95℃DNA解链;第(二)步:冷却到55...
PCR
怎么获得
目的基因
答:
PCR是根据建基互补的原则来进行DNA扩增的。用PCR来获得目的基因,
是依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物(即上游引物,下游引物)
。通过PCR的变性--退火--延伸三个基本反应,在引物区间内的基因就能大量被复制,达到钓取基因的目的。PCR三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右...
PCR扩增技术
获取
目的基因的
原理是?
答:
PCR技术的
基本原理 类似于DNA的天然复制
过程
,其特异性依赖于与
靶
序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经
PCR扩增
形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②...
用
PCR扩增目的基因
,如何计算等长
目的基因的
数量?
答:
扩增PCR
反应:按照设定好的PCR条件,进行扩增反应。
PCR过程
中,使用特定引物使目标基因序列得以扩增。分析PCR产物:将PCR产物进行电泳分析,可以通过琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳等方法来检测扩增产物。等长
目的基因
会出现明显的带状条带,且条带的大小与目标
基因的
长度一致。定量PCR产物:使用比较标准物或内参...
什么是
PCR技术
?
答:
PCR技术
是模拟体内DNA的天然复制
过程
,在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术,主要用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。在待
扩增的
DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2ⁿ倍。PCR的每个循环过程包括高温变性、低温退火、中温延伸三个不同的...
PCR技术扩增目的基因的过程
需不需要ATP?为什么?
答:
需要,因为
PCR技术
就是细胞内DNA复制
过程
在体外的体现,过程中有很多酶参与,在细胞内需要ATP,在体外更需要提供能量,在PCR所加的缓冲液中已经加入了ATP,所以在加了缓冲液后不用再单独加入ATP
简述
PCR技术
操作步骤
答:
主要的
技术
步骤是:(1)DNA变性 加热使
靶
DNA序列双链解离成单链DNA。(2)引物与靶DNA退火 适当降低温度,使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。(3)引物延伸 在DNA聚合酶的催化下,引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后,又可作为模板与引物杂交,...
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