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pcr的基本原理是什么
求分子克隆具体实验步骤一份~~多谢各位大侠啦~
答:
PCR
由变性--退火--延伸三个
基本
反应步骤构成:①模板DNA的高温变性:模板DNA经加热至94℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引物的低温退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列...
PCR
引物浓度一般选多少
答:
PCR
引物浓度一般选5~20μmol/L。PCR反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即:引物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。引物有多种设计方法,由PCR在实验中的目的决定,但
基本
原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源:Taq和Pfu,分别...
霍乱弧菌的检测方法
答:
在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长,因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株,推荐使用天津生物芯片生产的霍乱弧菌诊断血清。 1,普通聚合酶链反应法核酸扩增技术,即聚合酶链式反应(polymerase chainreaction,
PCR
),其
基本原理是
设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列...
食品安全快速检测技术的测定
原理是什么
?
答:
分子生物,聚合酶链式反应(
PCR
)是分子生物学领域中迅速发展和广泛应用的一种技术。PCR技术主要用于检测细菌,其
基本原理是
应用细菌遗传物质中各菌属菌种高度保守的核酸序列,设计出相关引物,对提取到的细菌核酸片段进行扩增,用凝胶电泳和紫外核酸检测仪观察扩增结果。从样品前处理到PCR扩增及得出实验结果24h...
实时荧光
PCR
技术内容简介
答:
本书全面深入地讲解了实时荧光
PCR
技术的基础理论和实际应用,共分为25个章节。首先,它详细阐述了实时荧光PCR技术
的基本原理
和操作方法,包括其核心原理和实际操作步骤。接着,章节转向实验室设计与质量管理,强调了标本采集、运送、保存以及核酸提取的标准化流程,这些都是确保检测准确性的关键环节。后续章节...
做
PCR
时Master Mix
是什么
意思啊
答:
PCR的
Master Mix是指PCR的预混物,也叫混合液,指除模板和底物外,其他成分按最佳比例混合。PCR使用时可直接加入模板和底漆,节省时间,不需要考虑反应体系的性能。简而言之,就是按比例混合成分,所以使用起来更方便。如今一些常见的聚合酶链反应盒,如biodai和roche,配液使用起来对于实验人员是很方便。
pcr
都需要
什么
原料
答:
pcr
需要的原料有:物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液。
PCR是
利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(...
请详细解释一下DNA与RNA
答:
PCR
技术
的基本原理
类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;②模板DNA与引 物...
目的基因克隆
的基本原理
答:
基因克隆是一种通过人工手段将一个特定的基因复制并插入到另一个生物体的基因组中的技术,被广泛应用于基因工程和生物医学研究领域。其
基本原理
包括:1. 提取目标基因:首先从目标生物体中提取需要克隆的基因,通常采用
PCR
或限制性酶切等方法来从基因组DNA中放大或切割出目标基因。2. 将目标基因克隆到...
...研制与开发时,目的基因的鉴定方法有哪些?其
原理是什么
?
答:
最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体(recombinant)。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆,所以筛选(dcreening)是基因克隆的重要步骤。在构建载体,选择宿主细胞、设计分子克隆方案时都必须仔细考虑筛选的问题。以下就常用技术
的基本原理
加以介绍。一、...
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