00问答网
所有问题
当前搜索:
连T载体
序列连在
T载体
上,用sacⅡ单酶切之后目的条带没有了(
t载体
有),这是咋回...
答:
将原题贴上,话说的不明不白,我有点无法理解。如果理论上:用用sacⅡ单酶后能出现你的目的条带,但实际上没有酶切出目的条带(
t载体
有),我认为原因是
T载体
自连,你的目的条带没有连上!建议重连,并用菌落PCR检验,然后用酶切检验。
pcr产物胶回收浓度低,能不能和
T载体
连接
答:
可以,不过浓度太低的话会导致
载体
自连的比例增加,挑去单克隆后提取的质粒可能是空载的概率增加
我想问一下,
载体T
1-simple会发生自连吗?如果会原因是什么,毕竟它的末端...
答:
会,
T载体
自连很常见。不要太纠缠这种问题,公司出产的T载体不可能加工得100%干净。
外源性基因与
载体
的连接方式哪四种
答:
还真是个问题,我的理解可能不是你要的答案。首先是T,A连接,就是现在通常使用的
T载体
,一般的PCR产物都在两端加个A,这样T,A相配,T4连接酶可以把他们连在一起。第二,粘性酶切位点连接,把载体和外源基因用相同的酶进行酶切(双酶切,或者单酶切都可以)回收相应的片段,用酶切出来的粘性...
什么是
t载体
答:
t载体
就是T-DNA,是一类可以重组到受体生物染色体上的载体,通常被应用于植物的基因重组过程中。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A),与
T载体
之间的A-T互补性可提高PCR产物克隆的效率。染色体(chromosome) 是真核细胞在有丝分裂或减数分裂时遗传物质存在的特定形式,是间期细胞染色质结构紧密...
T 载体
与 目的基因连接成功,测序结果也正确。从新摇菌,提取质粒,在进 ...
答:
解决办法:1、cla1是一个比较不常见的酶,可能酶切体系和ECOR1的缓冲体系不一样,试着分别酶切,就是先切cla1,然后纯化后切ECOR1;或者查找哪个酶的酶切效率高些,那个后切;2、3个小时可能太短了,我一般都是5个小时,或者过夜;3、可能是你菌挑错了,或污染了,重新调菌或者把原来构建成功的...
连接到
T载体
上面后,做双酶切,条带不正确,目的片段变大是什么原因_百度...
答:
用的是
T
-simple吗?如果不是simple
载体
,有可能切开的不是你引入的的没切位点,而是载体本身的
我的目的片段
连T载体
后转化,提质粒,但是提出来的东西和我的目的片段差...
答:
质粒有超螺旋,环状还有复制不完全三种,可能会同时存在于大肠杆菌中,所以你所提出来的质粒直接电泳时无法判断分子量的,如果想看看是否插入成功,你可以将你的片段酶切下来再进行电泳,来证明是否有插入,才比较可行
37℃
T载体
能连接吗
答:
不好吧,温度过高,本身的DNA就会降解,对
载体
也不好 一般克隆载体是16°连接的,4°连接过夜也可以
...末端可以接上碱基A,易于与
T载体
连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端...
答:
那个回答者的意思是,产物和
载体
属于两条DNA链,产物带有A的链是与载体带
T
的链互补的,而产物带有A的“互补链”与载体带T的链进行连接
<涓婁竴椤
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜