简述手性高效液相色谱测定具有光学活性的有机化合物光学纯度的原理和方法？

Question

仪器分析实验:高效液相色谱分离手性有机化合物

Answer 1

高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。

高效液相色谱法有“四高一广”的原理：

①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

②高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

③高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

④高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

⑤应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

Answer 2

采用手性固定相或添加了手性试剂的流动相进行手性异构体（对映体）分离的色谱技术。液相色谱和气相色谱都可以进行手性异构体分离。它利用手性固定相或手性流动相中的手性试剂与被测手性异构体分子的空间和特异相互作用的差异，将对映体拆分开。手性色谱在生物和医药领域具有重要应用
手性药物编辑
化合物中某个碳原子上连接4个互不相同的基团时，该碳原子被称为手性碳原子或手性中心，分子中含有手性中心的药物称为手性药物。
手性药物一般用左旋体（levorotatory）或右旋体（dextrotatory）表示，左旋体在药物名称前冠l-或（一）-；右旋体冠d-或（+）-；左旋体和右旋体的等量混合物称为外消旋体（racemate or racemic mixture），名称前冠（dl）-或（±）-。对于糖类、氨基酸等立体化学构型，也可以用D型和L型表示；按照手性中心连接取代基原子序数排列顺序，也有用R型、s型表示的。
目前临床应用的手性药物中，除天然和半合成药物外，人工合成的手性药物仍以外消旋体为主。然而在外消旋体药物中各对映体间的药效学，药动学以及毒性常有很大差异。很多情况是一种对映体有活性，而另一种没有或活性很低，甚至有较大毒性。因此有必要研究建市快速、准确、灵敏、简便的分离分析对映体药物的方法。
手性药物分离方法编辑
手性药物分离方法很多，其原理大都是将对映体的混合物转换成非对映体异构体，然后再利用它们理化性质上的差异使之分离。主要可分为两大类，即色谱法与非色谱法。非色谱法主要有结晶法，也包括微生物或酶消化法。但是这些方法耗时较长，过程复杂，纯度较差，且难于进行微量分离和测定，具有局限性。色谱法成为目前手性药物分离分析的主要方法，包括薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱、超临界流体色谱和毛细管电泳等。本回答被提问者和网友采纳

Answer 3

手性高效液相色谱测定具有光学活性的有机化合物光学纯度的原理是：
1） 采用填充有含有手性分子的固定相的色谱柱， 利用流动性将待测定手性分子在色谱柱中流动， 因为色谱中的固定相对测定的手性分子的吸附不同， 从而分开R和S构型。
2）方法是用有机溶剂做流动相， 测定物质用流动相通过手性色谱柱， 流出物质用光波测定。