霍乱弧菌国家规定是否属于强制性检验范围，又是如何检验的（检验方法），在动物上是否有疫苗；

Question

如题所述

Answer 1

霍乱弧菌检查常规方法是：直接涂片、染色检查、动力观察制动试验。
检查过程
(1)、增菌　称取检样25g，加入装有225mL碱性蛋白胨水(APW)的广口瓶内。固体样品应以均质器9000r/min-10000r/min打碎，或以剪刀充分剪碎。(36±1)℃培养6h-8h和16h-24h。　如为牡蛎样品，应同样制备另一份检样，置于APW中，42℃培养6h-8h和16h-24h。　(2)、分离　以3mm-5mm接种环取6h-8h和16h-24h增菌培养液的表面生长物一环分别划线家终于TCBS琼脂平板至少各一个，于(36±1)℃培养18-24h。　在TCBS琼脂上，典型的霍乱弧菌菌落为大的，光滑，黄色，稍平，具有不透明中心和半透明的边缘。　(3)、初步鉴定　① 用接种环挑取TCBS琼脂平板上2-5个可疑菌落，划线于T1N1琼脂平板上，(36±1)℃培养12h-18h。　② 以无菌白色滤纸沾取T1N1琼脂表面培养物，滴加氧化酶试剂进行氧化酶试验。　③ 以无菌环取氧化酶阳性的培养物于0.5%去氧胆酸钠液试剂滴中，进行粘丝试验。　④ 以接种针取氧化酶和粘丝试验阳性的培养物，接种TSI、KIA和AGS，穿刺底层并划线斜面。　⑤ 以接种针取上项相同培养物接种T1N0和T1N3肉汤。　⑥ 将TSI、KIA、AGS、T1N0和T1N3肉汤于(36±1)℃培养18h-24h。
目前正在接受WHO预审的两种口服霍乱疫苗，均是灭活全细胞霍乱弧菌血清群O1疫苗：Shanchol疫苗还含有霍乱弧菌血清群O139；而Dukoral疫苗（Crucell）含有重组的霍乱毒素B亚单位。
实际应用中，Dukoral疫苗短期内（6个月）可提供84%的保护作用，并已在亚洲、非洲成功应用；而Shanchol疫苗效能仅在印度Kolkata试验条件下检验过，其实际临床应用的有效性仍待进一步确定，且该试验是对疫苗的长期（接种后2、3和5年）保护作用进行评估，其接种后第一个月的免疫效果仍不清楚。