如何建立反相高效液相色谱的分析方法

Question

如题所述

Answer 1

首先，根据物质的紫外吸收确定波长。
比如A物质扫描全波长紫外图谱，确定它在254nm波长下有最大吸收，另外有末端吸收，那么波长就可以选择254nm或者210nm；
其次，根据物质的极性选择色谱柱和流动相比例。比如极性很小的物质，就可以把流动相中的有机相比例增大。
另外的一些要根据物质的特性来选择，比如色谱峰容易拖尾，可选择缓冲盐和扫尾剂，比如某些酸性化合物或者碱性化合物可以用离子对试剂。
其他的类似于水相pH值、柱温等条件要根据实际情况来调节。比如主物质和杂质峰分不开之类的情况，不过属于微调了。