PI染色不需要洗涤。
PI染色后不要洗涤，直接上机染色，但是必须保证染色后在1小时之内上机检测。实验需要这样设立对照，即是说：Annexin V和PI单染的各需要一个（每组用估计凋亡率最高的细胞染色），另外，还需要一个不要任何染色的作为空白（用空白细胞）。
PI经常被用来与Calcein-AM或者FDA等荧光探针一起使用，能同时对活细胞和死细胞染色。PI-DNA复合物的激发和发射波长分别为535nm和615nm。
结果判断
在前散射光对侧散射光的散点图或地形图上，凋亡细胞与正常细胞相比，前散射光降低，而侧散射光可高可低，与细胞的类型有关；在分析PI荧光的直方图时，先用门技术排除成双或聚集的细胞以及发微弱荧光的细胞碎片，在PI荧光的直方图上，凋亡细胞在G1/G0期前出现一亚二倍体峰。
如以G1/G0期所在位置的荧光强度为1.0，则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体峰的荧光强度为0.45，可用鸡和鲑鱼的红细胞的PI荧光强度做参照标准，两者分别为0.35和0.7，可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。
以上内容参考：百度百科-PI单染色法
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