分离大肠杆菌：
1、划线分离法
将培养皿底部，用拇指和无名指固定成倾斜状态，在火焰旁，将培养皿稍微打开。在此同时，用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液，迅速送入培养皿内，在平板培养基的一边，作第一次平行滑线3到5条。
转动培养皿约70度角用烧过冷却的接种针，通过第一次滑线部分作第二次平板划线，然后再用同样方法，通过第二次平行滑线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。
划线时接种针应与平板表面成30度角左右，不要使接种针碰到培养皿边缘，也不要将培养划破，划线完完毕后，盖上皿盖，倒置于恒温箱培养。
2、涂布分离法
先将培养的菌液稀释通常稀释到10^-5到10^-7之间，然后取0.1ml不同稀释度的稀释菌液，放在培养皿的固体培养基上。
用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落，通常每个培养皿有20个以内的单个菌落最为合适。
将每个菌落分别接在斜面上扩增培养后，再做功能性实验。
分离芽孢杆菌：
先进行富集培养，挑取具有芽孢的菌落进行划线纯化培养，获得单菌落。
取富集菌液，至于75度到80度水浴15到20分钟，梯度稀释10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7，选择三个合适的梯度混菌或涂布于营养琼脂麦芽汁培养基或直接涂布于酪素培养基上初筛也可划线分离。
每个梯度两个平皿，将平板倒置，于35度到37度的环境下24到48个小时。
对长出的菌落进行编号，选择生长快，菌落大，表面干燥、粗糙，不透明的聚落转接于斜面备。挑取少许菌苔涂片，做芽孢染色判断是否为芽孢杆菌。
扩展资料：
大肠杆菌的特性：
理化特性
1、大肠杆菌是短杆菌，两端呈钝圆形，革兰阴性。有时因环境不同，个别菌体出现近似球杆状或长丝状 。
2、大肠杆菌多是单一或两个存在，但不会排列呈长链形状；大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构，但是不能形成芽孢。
3、多数大肠杆菌菌株生长有菌毛，其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛 。
4、大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气，个别菌株不产气，大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物，也可以利用多种有机酸盐。
芽孢杆菌的特性：
1、代谢快、繁殖快，四小时增殖10万倍，标准菌四小时仅可繁殖6倍。
2、无湿状态可耐低温－60℃、耐高温+280℃，耐强酸、耐强碱、抗菌消毒、耐高氧（嗜氧繁殖）、耐低氧（厌氧繁殖）。
3、体积比一般病源菌分子大四倍数，占据空间优势，抑制有害菌的生长繁殖。
参考资料来源：