LB培养基怎么配啊?

如题所述

LB(Luria-Bertani)培养基是一种常用的细菌培养基,其主要成分包括三种:牛肉提取物、酵母粉和NaCl。LB培养基的配制相对简单,但需要注意一些关键的步骤,以确保培养基的质量和稳定性。下面将详细介绍LB培养基的配制方法和注意事项。
一、LB培养基的配方
LB培养基的配方如下:
牛肉提取物:10克/L
酵母粉:5克/L
NaCl:10克/L
水:1000 mL
二、LB培养基的配制步骤
1. 称取所需的牛肉提取物、酵母粉和NaCl,加入约500 mL的去离子水中,用力搅拌,使其充分溶解。
2. 加入足量的去离子水,使总体积达到1000 mL。
3. 将混合液倒入烧过瓶中,用自动的压力灭菌器进行高压灭菌处理。如果没有自动灭菌器,也可以用压力锅进行灭菌处理。
4. 灭菌后,将烧过瓶放置在常温下,待培养基冷却到室温后,可以进行使用或保存。
三、LB培养基的注意事项
1. 材料的选择:LB培养基的质量和稳定性与使用的原材料有关。因此,需要选择高质量的牛肉提取物、酵母粉和NaCl,以确保培养基的质量和稳定性。
2. 搅拌的时间:在配制过程中,需要充分搅拌混合液,以确保原材料充分溶解。通常需要搅拌10-20分钟,直到混合液变得均匀。
3. 灭菌的温度和时间:灭菌是保证培养基质量和稳定性的重要步骤。在灭菌过程中,需要注意灭菌的温度和时间。通常使用高压灭菌器,在121°C下灭菌20-30分钟。如果使用压力锅进行灭菌,需要在100°C下灭菌30-60分钟。
4. 冷却的时间:在灭菌后,需要将烧过瓶放置在室温下冷却到室温后再使用或保存。如果在灭菌后立即使用或保存,可能会影响培养基的质量和稳定性。
5. 储存的条件:LB培养基可以在4°C下保存1-2个月,也可以在-20°C下保存6个月以上。在储存过程中,需要注意避免光照和震动,以避免影响培养基的质量和稳定性。
总之,LB培养基是一种常用的细菌培养基,其配制相对简单,但需要注意一些关键的步骤。在配制过程中,需要选择高质量的原材料,充分搅拌混合液,正确进行灭菌,冷却到室温后再使用或保存,以确保培养基的质量和稳定性。
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第1个回答  2022-08-16
LB培养基
配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
  胰化蛋白胨 10g
  酵母提取物 5g
  NaCl 5g
  摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.
  LB培养基出锅后待温度降到不太烫手时,加入过滤除菌的氨苄(过滤除菌用注射器加针头过滤器),摇匀培养基即可
如果加了琼脂粉的LB培养基一定要凝固前加氨苄 我做实验的时候大概55度,手能拿起来
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