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美正生物的沙门氏菌血清型分子鉴定试剂盒的检测步骤?
如题所述
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推荐答案 2021-09-30
美正生物的沙门氏菌血清型分子鉴定试剂盒的检测步骤:
1、核酸提取
加热法:刮取至少10个菌落,悬浮于100μL的无菌水中,漩涡震荡10s(如果菌落未能均匀分散,可适当延长震荡时间),95℃或沸水浴5min,冷却至室温,12000rpm离心5min,吸取上清。
试剂盒法:可使用商品化的试剂盒提取沙门氏菌的基因组DNA。
2、反应体系配置
从试剂盒中取出预混液,充分融化,涡旋后短暂离心,取22.5μL置于PCR管或PCR板中,然后各取模板2.5μL分别加入PCR管或PCR板中(每种模板要使用十二种预混液),盖好管盖或板膜,短暂离心,立即进行PCR扩增反应。
3、PCR扩增
PCR管或PCR板置于PCR仪上,推荐反应程序设定如下:反应体系为25μL,在第二步每个循环60℃时检测荧光信号,检测通道选择FAM、HEX(VIC)、CY5。
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第1个回答 2021-09-30
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