诊断维生素C缺乏症需要通过一系列检查。首先，如果患者长期缺乏新鲜蔬果摄入，或者有慢性疾病或人工喂养等特殊情况，可能会有诊断线索。临床表现和X线检查也是关键，毛细血管脆性增加是一个明显的体征。治疗试验显示，维生素C治疗效果显著，血清和白细胞维生素C浓度下降，凝血酶时间延长也支持诊断。
为了确诊，实验室检查十分重要。血浆维生素C测定反映摄入情况，正常值低于100ml被认为是不足，0.4-0.8mg/100ml为足够，大于0.8mg/100ml则表示充足。白细胞中维生素C含量测定则反映体内储存，正常值应大于113.6μmol/108白细胞。尿液维生素C含量测定也很重要，24小时尿液中含量不足12mg/100ml可能表明缺乏。
维生素C耐量试验可以进一步排除其他疾病，如静脉注射20mg/kg体重的维生素C后，4小时内尿液中含量超过85μmol/L排除坏血病。口服500mg维生素C后，尿液排出量达到13mg则表明充足。
辅助检查包括毛细血管脆性试验，如压迫法和正压法，观察皮肤出血点。X线检查显示出长骨干骺端钙化带异常、骨质疏松、骨折和骨骺分离等症状，这些特征性表现对诊断具有重要意义，如温伯格环、骨刺等。
在鉴别诊断中，还需注意与骨髓炎、关节炎等疾病进行区分，幼儿的下肢肿胀和假性瘫痪也需要排除其他可能的病因。综合这些检查结果，医生才能准确地诊断维生素C缺乏症。
维生素C（抗坏血酸）是胶原蛋白形成所必需的，它有助于保持间质物质的完整，如结缔组织，骨样组织以及牙本质。严重缺乏可引起坏血病，这是一种急性或慢性疾病，特征为出血，类骨质及牙本质形成异常。儿童主要表现为骨发育障碍，肢体肿痛，假性瘫痪，皮下出血。成人表现为齿龈肿胀、出血，皮下瘀点，关节及肌肉疼痛，毛囊角化等。