请哪位高人帮我回答一下有关细胞生物学的问题

1.参考下列20种研究方法(A-T),分别设计一种最佳方案(包括工作思路及原理)来探究下面的10个问题。
方法:A、RNAi技术; B、Southern杂交 ; C、扫描电镜技术; D、细胞显微分光光度计; E、免疫荧光技术; F、电镜超薄切片技术; G、Northern杂交; H、放射自显影技术; I、核磁共振技术; J、DNA序列分析; K、原位杂交技术; L、Western blot杂交技术; M、GFP的应用; N、电镜负染色技术; O、细胞融合技术; P、免疫共沉淀; Q、免疫电镜技术; R、冷冻蚀刻复型技术; S、BrdU incorporation ; T、DNA定点突变技术
问题:
1)探讨内质网的分布与微管系统的分布关系。
2)微管系统的动态不稳定性。
3)已克隆了鸡卵清蛋白的基因,如何证明在雏鸡的输卵管中该基因不转录而在产卵母鸡输卵管中则活跃的转录 。
4)已克隆了人的rDNA,问rDNA分布在人的哪几条染色体上。
5)M期HeLa细胞中具有促进分裂间期细胞染色质提前凝集的活性,实验证明。
6)体外培养细胞,从G1期到S期,细胞表面形态结构的变化。
7)CENP-E在细胞分裂的前中期与微管结合,以后逐渐转移到动粒上,到分裂后期转移到纺锤体的中间区。如何证明。
8)原代细胞长成致密单层,由于接触抑制作用DNA合成停止,如何证明。
9)探讨Racl基因表达的抑制对NIH3T3细胞迁移行为(如迁移路线、迁移速度等)的影响。
10)CyclinB和CDK1为MPF的两个亚基,如何证明CyclinB和CDK1的结合?
2.有被小泡的分子结构及其功能如何?
3.从细胞增殖角度看,细胞可分为哪几类?
4.设计实验证明细胞器(如高尔基体)的分布与微管系统有关。
5.举例说明蛋白质的磷酸化和去磷酸化在细胞周期调控中的作用。
6.p53蛋白在细胞周期中的作用

(1)探讨内质网的分布与微管系统分布的方法如下
内质网作为一种脂质膜结构,我们可以选用放射性标记的CDP-胆碱作为标记物,CDP胆碱可以用于卵磷脂的合成。然后利用放射自显影技术进行观察。而微管由于可以被紫杉醇结合而抑制解聚,我们可以用罗丹明标记的抗微管蛋白的抗体与微管特异性结合(免疫荧光技术),然后使用荧光显微镜观察。然后对比以上两组观测图像是否具有相关性
(2)常使用的方法是将带有罗丹明标记的微管蛋白连续注入体外培养的动物细胞,用荧光显微镜观察。
(3)1.可以利用oligo-DT或者oligo-U对提取的总RNA进行亲和层析,提取mRNA,然后用DNA探针或者RNA探针进行southern杂交。2.当然卵清蛋白作为一种蛋白质,自然可以利用免疫荧光技术。
(4)利用的是western blot。这个不细说了
(5)将M期的hela细胞与其他间期细胞在仙台病毒下诱导融合,并继续培养一段时间。发现与M期hela细胞融合的间期细胞发生了各种形态的染色体凝集,并称之为PCC(早熟染色体凝集)。这种染色体则被称为超前凝集染色体。G1为单线状,S为粉末状,G2为双线染色体状。
(6)要观察细胞表面形态结构的变化,毫无疑问利用的是扫描电镜技术。扫描电镜技术是利用电子束光源照射到细胞表面而产生的散射电子,并将其收集成像。其基本过程包括固定,脱水,干燥,镀膜,观察等过程。干燥过程一般选用CO2临界点干燥法,由于不存在气液相面,细胞的原始形态能够得到良好的保持。镀膜是为了得到良好的二次电子信号。扫描电镜成像具有良好的立体感,分辨率达0.7nm。
(7)方法是表达融合了绿色荧光蛋白(GFP,Green fluorescence protein)的CENP-E蛋白。提取并注入真核细胞。绿色荧光蛋白不是一种糖蛋白,而且是一种胞质蛋白,可以采用原核如大肠杆菌表达系统进行表达。
(8)BrdU incorporation后培养较长一段时间。只有在复制过程中的DNA才会掺入BrdU。掺入后易引起DNA突变,可对特定的某段DNA进行序列分析。
(9)虽然不知道Racl基因是为何物,但是目前使用最多的抑制基因表达的方法主要是基因打靶技术和参考中的RNAi技术。当然还有反基因技术(注意:是区别于反义RNA的技术,使用的是DNA片段)
(10)可采用荧光共振能量转移或者酵母双杂交实验,具体可以查阅百度百科。(参考中的方法无此方法)
呵呵,要给分,就先谢过了
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第1个回答  2010-12-31
6.p53蛋白在细胞周期中的作用
这个我会
由这种基因编码的蛋白质(protein)是一种转录(transcription)因子,其控制着细胞周期的启动。许多有关细胞健康的信号向p53蛋白发送。关于是否开始细胞分裂就由这个细胞决定。如果这个细胞受损,又不能得到修复,则p53蛋白将参与启动过程,使这个细胞在细胞凋亡(apoptosis)中死去。有p53缺陷的细胞没有这种控制,甚至在不利条件下继续分裂。像所有其它肿瘤抑制因子一样,p53基因在正常情况下对细胞分裂起着减慢或监视的作用。 细胞中抑制癌变的基因“p53”会判断DNA变异的程度,如果变异较小,这种基因就促使细胞自我修复,若DNA变异较大,“p53”就诱导细胞凋亡。本回答被网友采纳
第2个回答  2010-12-31
这种东西自己看书吧
第3个回答  2010-12-30
你好:
推荐你一本书吧,高教出版社的《细胞生物学》,你的问题在哪里都能找到。
第4个回答  2010-12-30
你这这题目太多了啊
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