PBS缓冲液怎么配制

Question

如题所述

Answer 1

揭示实验中的秘宝：精准配制PBS缓冲液全攻略

在生物化学实验的舞台上，PB和PBS这两款神奇的缓冲液扮演着不可或缺的角色。它们分别是PHosphate Buffer（简称PB）和Phosphate Buffered Saline（简称PBS）的缩写，各自有其独特的特性。

首先，PB，即磷酸盐缓冲溶液，通过磷酸缓冲对（H₂PO₄^-和HPO₄^2-）巧妙地维持溶液的pH值，阳离子通常选用Na⁺或K⁺。而PBS，更像PB的升级版，是磷酸盐缓冲生理盐水，它在PB的基础上添加了0.9%的NaCl，使其渗透压与人体体液相近，pH值一般稳定在7.2-7.4。有时，为了兼容特定实验需求，如引入K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺，D-PBS（杜氏缓冲盐水）则会调整磷酸二氢钾的比例，避免与金属离子形成沉淀。

缓冲力的精确掌控

PB缓冲液的pH范围广泛，无论是酸性（NaH₂PO₄或KH₂PO₄，pH 1-5）、碱性（Na₂HPO₄或K₂HPO₄，pH 9-12）还是中性（等浓度H₂PO₄^-和HPO₄^2-，pH 5.5-8.5），都能轻松应对。浓度的计算需注意，0.1M或0.01M的描述是指溶液中磷酸根离子的总浓度，而非钠或钾离子。

配置艺术：一步到位的秘诀

PBS的配置方法看似繁琐，实则有迹可循。根据Cold Spring Harbor Protocols，1×PBS的配置只需精确称取物质，溶于800ml超纯水中，定容至1L。考虑到使用频繁，母液（10×或20×）的配置则更为便捷，只需稀释即可。而不同pH值的0.2M PB，根据Na₂HPO₄·2H₂O、Na₂HPO₄·12H₂O或Na₂HPO₄·2H₂O的分子量，可以精确计算所需物质的量。

优缺点分析：选择的智慧

尽管PB缓冲液优点明显，如易配制、适用pH范围广且稳定性强，但浓度较高时，它可能与钙、镁离子形成沉淀，干扰某些生化反应，如抑制磷酸酯酶的活性。因此，选择合适的浓度和应用环境至关重要。

总结来说，无论是PB还是PBS，都是实验者手中的魔法工具。理解它们的工作原理，掌握正确的配制方法，才能在实验中游刃有余，取得理想的实验结果。