PCR实验 延长变性时间对反应有何影响

Question

如题所述

Answer 1

如果在推荐的变性时间之上再延长,这样好像不太好,在95 °C条件下变性30 Sec一般都能够使模板变性.还有你说的变性是指循环的变性还是预变性?有的热启动酶需要预变性时间比较长,一般3-5 min就够了.变性时间延长会导致酶活性的降低.如用Takara的荧光定量PCR试剂盒时,预变性时间为30sec,循环中变性时间为5 Sec.