急！！！蛋白质分子量用NativePAGE测定，分子量是200KD，在巯基乙醇存在下用SDS PA

Question

急！！！蛋白质分子量用NativePAGE测定，分子量是200KD，在巯基乙醇存在下用SDS PAGE测定，分子量是40KD和60KD，说明了蛋白质亚基组成是什么？

Answer 1

蛋白质亚基组成应该在分子构建阶段就清楚了吧
从你的描述感觉像是类似于抗体两条重链+两条轻链的结构追问

题目是这样的-_-||

追答

这种题目真是一点实际价值都没有。。。

给你稍微解释一下吧
凝胶过滤就是分子排阻，分离的蛋白质是处在未变性的状态，此时的分子量就是蛋白质准确分子量。
Native-Page是非变性电泳，分离的蛋白质也是未变性状态，此时分子量也是准确的。
SDS-PAGE是变性电泳，会解离亚基，b-ME是还原剂，会破坏二硫键，故此时的分子量为表观分子量，并不是蛋白的准确分子量。
所以这个蛋白是由两个大小相同的亚基（100kD）组成，每个亚基由两条肽链（60kD 和40kD）组成，它们之间通过二硫键连接。
这个结构基本类似于一个抗体的结构，两条重链+两条轻链，不过抗体不完全是通过二硫键链接的。

最后吐槽一下，这个题目真的没意义，重组蛋白构建阶段就清楚亚基构成才去做构建接着才会有分子筛纯化PAGE检测什么的。

追问

谢谢你，哎，还是买过来的考研真题呢o(╯□╰)o

追答

如果是为了考试，这个题目是有意义的。
作为实际应用，如果你以后做这行，你就会明白这题目就是在扯淡了，实际工作根本不会产生这样的问题的。。。。

追问

嗯嗯！谢谢你