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目的基因与目的基因结合
基因工程中怎样把两段
目的基因
连接起来
答:
1、把两个
目的
片段PCR扩增出来,或许两头都还要酶切一下,以形成互补的粘性末端。PCR时注意所用种类的热聚合酶是否在产物末端添加A,酌情处理。2、两个互补粘性末端用连接酶连接,两个平末端用DNA聚合酶连接,两个非互补粘性末端用DNA聚合酶一边补平一边连接。
(2)中的“
目的基因
—目的基因 载体—载体”是说它们自己和自己连起来吗...
答:
将
目的基因
克隆进某载体的基本过程如下:扩增目的基因(此时的目的基因连在旧载体上,且基因两侧有多个限制性酶切位点,即处在多克隆位点内,整体呈环形,因为也只有正常环形DNA即质粒能在细菌内扩增)——提纯目的基因,并利用单酶切或双酶切将其切下(此时目的基因呈线性,且两端是酶切过后留下的粘性...
重组dna技术包括哪些主要步骤
答:
重组DNA技术主要包括四个步骤:提取目的基因、
目的基因与
运载体
结合
、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。1、提取目的基因 获取目的基因主要有两条途径:一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因;另一条是人工合成基因。直接分离基因最常用的方法是“鸟枪法”,又叫“散弹射击法”。2、目的基因与...
基因工程的目的基因是什么
目的基因与
运载体
结合
的目的又是什么?_百 ...
答:
目的基因:在基因工程设计和操作中,被用于基因重组、改变受体细胞性状和获得预期表达产物的基因.目的基因一般是结构基因(或调控因子),也就是能转录和翻译出多肽或蛋白质的基因.
目的基因与
运载体
结合
的目的:使目的基因在受体细胞内能够复制和表达(即使目的基因能够随着运载体的复制而复制或者能够整合到受体...
如何使
目的基因与
质粒
结合
形成重组质粒?
答:
露出相对应的粘性末端,再用DNA连接酶使两者的粘性末端
结合
形成重组质粒。质粒是目的基因的运载体,在用鸟枪法或人工合成法提取目的基因后,用限制性内切酶将质粒切开,使
目的基因与
切开的质粒具有相同的粘性末端。它们的碱基恰好配对,氢键自动结合,再用DNA连接酶将切口补上,重组质粒就形成了。
如何将
目的基因
整合到细菌染色体中去
答:
一般方法和步骤:确定
目的基因
需要整合到基因组上的位置;设计整合片段:目的基因两端连接与基因组上目的基因的位置两端的序列同源,这两个片段分别称之为上、下同源臂,长度一般在70bp至200之间,上下同源臂之间一般除了目的基因还要带上筛选标记基因,同源臂之间(包括同源臂)这一段序列称为插入片段;插入...
若不用载体,直接将
目的基因
导入受体细胞,目的基因能否自行整合到受体...
答:
这基本是不可能的,因为只是一段
基因
片段,是无法进行复制扩增的。通过载体进行整合,是因为载体具有自主复制的功能,能够在受体细胞中生存。
基因工程的目的基因是什么
目的基因与
运载体
结合
的目的
答:
目的基因
就是你要进行表达的基因。例如:我们想让棉花产生毒蛋白防治害虫,那就从一些芽孢杆菌中找到能合成这些有毒的物质的基因,再将这些基因加到运载体上,导入大肠杆菌细胞内。这个需要导入的基因就是目的基因。
基因表达载体的
目的基因与
运载体
结合
答:
首先碱基互补配对
结合
,两个黏性末端吻合在一起,碱基之间形成氢键,再加入适量DNA连接酶,催化两条DNA链之间形成磷酸二酯键,从而将相邻的脱氧核糖核酸连接起来,形成一个重组DNA分子。如人的胰岛素
基因
就是通过这种方法与大肠杆菌中的质粒DNA分子结合,形成重组DNA分子(也叫重组质粒)的。
基因工程中
目的基因
鉴定中的分子杂交技术的原理和方法?
答:
目的基因的鉴定中所用到的方法DNA分子杂交技术.利用单链的基因探针
与目的基因结合
.课本上并没有提到原理.应该是碱基互补配对.
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