什么是PCR技术的非特异性扩增？

Question

如题所述

Answer 1

就是引物并没有与我们设想的片段结合，最后扩增出非目的条带，一般低退火温度会增加非特异性扩增，高退火温度会减少非特异性扩增。

低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。

扩展资料：

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：

①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；

②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；

③引物的延伸：DNA模板-引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

参考资料来源：百度百科-聚合酶链式反应

Answer 2

PCR非特异性扩增指的是你进行PCR所扩增出来的条带不是所要的，引物与模板在非目的条带处有错配，导致延伸产物不是目的条带。非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带。
引起非特异性扩增的原因有很多，Mg2+浓度过高、退火温度太低、引物特异性不好等等原因本回答被提问者采纳

Answer 3

就是引物并没有与我们设想的片段结合，最后扩增出非目的条带，一般低退火温度会增加非特异性扩增，高退火温度会减少非特异性扩增。追问

大约的温度是多少？

Answer 4

应该是跑胶条带和预计的不一样，你可以试着调整一下Mg2+浓度看看追问

我只是想知道非特异性扩增的意思。