从克隆载体上PCR出目的基因原理

Question

如题所述

Answer 1

克隆载体是环状双链DNA。PCR的原理：
首先，当热变性，模板双链分开成两条单链模板
然后，两条引物分别结合上各自的模板
聚合酶，催化dNTP等进行引物延伸，成为两对长链模板，由于延伸的时间只够完成目的基因的长度，是不足以完成整个环状的延伸的。所以得到模板的互补链是有头有尾的。
这是一个循环。
再热变性，刚刚由引物变成的模板，解开成两条单链。新引物分别结合到两条模板上，延伸。引物结合模板，不断的变成新模板。
当然，新模板以旧模板为模板合成。而引物特异性结合位点确定了新的模板的长度。