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载体和目的基因的连接比例
做链接时
目的基因
和
载体的
量控制在多少?
答:
数量一般在 目的基因:载体=5:1-10:1
。双酶切的话,目的基因多加点没关系。目的基因越小,越往10:1上靠;目的基因片段大,反之。不过现在有很多种连接方法,体系不同,具体你还是要参考连接酶的说明书的。
大肠杆菌
连接载体
片段
比例
答:
您是想问大肠杆菌连接载体片段比例是多少吗?
这个比例为1:3或1:5
。通过查询大肠杆菌的质粒信息,目标基因片段与载体DNA的比例应该是1:3或1:5左右,这样可以确保目标基因片段被充分插入到载体DNA中,同时避免过多的目标基因片段导致载体DNA的破坏或不稳定。具体的比例需要根据实验需要进行优化,这个比例...
做
连接
的时候如何确定
载体与目的基因的
量,我虽然知道摩尔质量比为3:1...
答:
先算出你的
载体和目的基因的
浓度,(可以跟mark的亮度对比估算,也能用软件计算),再根据摩尔质量比和基因的大小算出质量比,再算出体积比就行
目的基因与载体的
体外
连接
.为什么目的基因要比载体多些?
答:
载体
一般比
目的
片段要长,为了避免载体自连,所以应使目的片段多些
基因连接载体和片段比例
问题
答:
1:1
目的基因
片段
与载体
质粒的选择?
答:
没有严格的界限的,从100bp--5000bp都可以使用一般的
载体的
。太长的使用一般载体的话就不太好连了。按现在研究的微生物
目的基因
很少有超过5000的。植物基因一般比较长,一般都是构建自己的启动子和转录起始位点,开始用载体克隆各个部分,最后再连到一起,形成一个复制翻译单位。你真正做几个基因,就会...
基因工程中
目的基因与
运
载体
结合的成功率
答:
第一个是标记基因,用来检测是否运
载体
进入到受体细胞里面。例子:运载体里面带有一个抵抗抗生素的基因。那么把所有受体细胞(比如,大肠杆菌)撒在培养皿上之后,培养皿中有抗生素,只有当运载体进入细胞之后才能抵抗抗生素,所以只有这些细胞才能存活。再者,要选择成功加入
目的基因的
运载体。在上面的例子中...
为什么调整
载体和目的基因的比例
,可以提高阳性率
答:
主要是相对提高目的片段的量,这样
目的基因与载体
片段碰撞结合的概率就高很多
问一个分子生物学的问题,片段
连接
答:
而且你的感受态转化效率也不低,可以考虑换下
连接
酶,而且连接时候
载体和目的
片断
的比例
可以再低点,尽可能减少自连,连接温度可以试试16度或者22度,时间长点无所谓,转化的时候冰浴时间也不用局限于30分钟以内,可以再长点.我也构建了一些载体,总的来说我觉得双酶切比单酶切好,单酶切不仅自连比较多给筛...
质粒
载体与目的基因连接
时,怎么配置
比例
答:
质粒
载体与目的基因连接
时,怎么配置
比例
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