简述用T-克隆载体进行PCR产物克隆的原理

如题所述

T克隆的原理是基于常规PCR反应中所使用Taq聚合酶能够在PCR产物的3‘末端非特异性添加一个A,这样实际上常规PCR产物都含有3端突出一个A的粘性末端。基于这个原理,常规的线性T-克隆载体(PUC18和PUC19等)在其3’末端添加一个T,这样的载体能够和任何PCR产物进行连接克隆,并不需要添加任何特异性的粘性末端位点。这个就是T克隆的原理了。
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第1个回答  2012-01-20
PCR产物末端都有A尾巴,与T-A克隆载体上的T互补连接到载体上
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