我用的载体是pUC18-T,目的基因为1000bp,目的基因上样量为10ul,亮度与DL2000的1000bp的条带相当,应该为50ng。
再根据摩尔质量比和基因的大小算出质量比,这句话我没有看明白,麻烦您给解释一下好吗,谢谢了!
追答摩尔质量: 载体:目的=1:3
即 载体质量/载体长度(bp数):目的质量/目的长度(bp数)=1:3
即 载体质量/目的质量=1/3 * 载体长度/目的长度
算出质量比后,再根据相对应的浓度算出体积比,然后根据你的体系算出各加多少体积
因为摩尔质量是质量除以相对分子质量,基因是有碱基组成的,假设每个碱基的相对分子质量相等,那么一个基因的相对分子质量就是与他的碱基数成正比,所以就用基因的长度比来代替基因的相对分子质量比
不好意思还得请教一下,如果我得到了质量比,也根据mark的亮度得到了浓度比,之后怎么能得到体积比呢?因为第一次做,思路不太清晰,麻烦您了,谢谢!
追答假设
载体和目的的浓度分别是:15ng/ul和20ng/ul
你的载体和目的的质量比需要 2/5
浓度=质量/体积
15/20 = 2:载体体积 / 5:目的体积
载体体积/目的体积 = 8/15