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载体和目的基因的连接比例
载体与
片段的摩尔
比例
如何计算
视频时间 1:10
基因工程中
目的基因与
运
载体
结合的成功率
答:
第一个是标记基因,用来检测是否运
载体
进入到受体细胞里面。例子:运载体里面带有一个抵抗抗生素的基因。那么把所有受体细胞(比如,大肠杆菌)撒在培养皿上之后,培养皿中有抗生素,只有当运载体进入细胞之后才能抵抗抗生素,所以只有这些细胞才能存活。再者,要选择成功加入
目的基因的
运载体。在上面的例子中...
如何提高
目的基因与载体连接的
效率
答:
要构建重组
载体的
目的就是把目的基因连到载体上,所以最有效的重组dna是目的基因-载体。目的基因-目的基因和载体-载体都是失败的结果,这种结果的产生相对导致基因-载体的结果产生率下降。一般做重组载体选择双酶切后
连接
,可以避免
载体和目的基因的
自连。目的基因的转化 根据不同的物种,将目的基因转化到...
(2)中的“
目的基因
—目的基因
载体
—载体”是说它们自己和自己连起来吗...
答:
此时
载体
呈线性)——
连接目的基因
和载体(用T4连接酶,粘性末端之间可以互补配对)——转化新质粒进感受态细胞后用抗体培养基筛选和富集 现在来看这个问题,其实关键所在是你到底用了单酶切还是双酶切(实际操作中二者都用的),单酶切就存在题目中的状况:1.目的基因首尾相连,因为你目的基因两侧是同一...
常用的
目的基因与载体的连接
方法有哪些
答:
dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成粘性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有
的连接
和封闭单链DNA的功能。
当
载体与目的基因连接
不上时,应该怎么去进行载体优化
答:
当
载体与目的基因连接
不上时,应该去进行载体优化:目的基因具有从起始密码子到终止密码子的方向性,必须正向连接才能获得正确克隆,构建的载体才能正确表达目的蛋白。相同的限制性核酸内切酶及DNA连接酶。前者在供体和受体上分别进行切割,使
目的基因的
两端与运载体有相同的粘性末端,DNA连接酶则将其连接。理...
常用的
目的基因与载体的连接
方法有哪些?
答:
这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有
的连接
和封闭单链DNA的功能。 粘性末端DNA片段的连接 DNA连接酶最突出的特点是,它能够催化外源DNA和
载体
分子之间发生连接作用,形成重组的DNA分子。 平末端DNA片段的连接 常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物...
为实现
目的基因与载体
结合,以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质,研究...
答:
④比较第4组和第5组实验结果可知,实验中用碱性磷酸酶处理
载体
可以降低仅有载体的菌落数,增加携带重组质粒的菌落
比例
.故答案:(1)含
目的基因的
DNA与载体(或质粒) DNA
连接
酶 氨苄青霉素(2)①大肠杆菌感受态细胞和平板培养基②摄取载体(或质粒、外源DNA)③DNA连接酶和限制 碱性磷酸④重...
用同种限制酶切质粒
和目的基因
DNA,连接后,产生的载体-
载体连接
物不是也...
答:
第二步是筛选出载体-目的基因,在上一步的培养基上挑菌,扩大培养之后,再接种的
目的基因的
培养基上,从而筛选出阳性克隆就可以了(这一步常用的、比较简单的方法就是蓝白板的筛选)。所以即使有载体-
载体的连接
物,也是会被在第二步筛选掉得。载体自连的概率其实不小,因为这是一个宏观统计的问题...
基因表达
载体的
构建
与
将
目的基因
导入受体细胞的区别?
答:
所谓的 使
目的基因
导入受体细胞 ,使目的基因导入受体细胞 讲的是一个过程 再说两个短语区别 基因表达
载体的
构建 就是 相当于重组 质粒 使其加上目的基因 目的基因导入受体细胞 显然也就是将重组好的质粒放入 受体细胞 使其 表达 发表一下看法 不知道对不对 呵呵 应该是这样的吧 ...
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